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上海信帆生物供應血管緊張素1放免代測服務,提供放免檢測服務

更新時間:2019-12-17      瀏覽次數:1465

上海信帆生物供應血管緊張素1放免代測服務,提供放免檢測服務!該試劑盒樣本收集的時候,請一定加入酶抑制劑,如果要檢測的話,樣本收集好了,請盡快檢測!本公司是提供放免實驗代測服務的,如果您有不清楚的地方,可以隨時咨詢我們!

 

血管緊張素放免分析試劑盒

125I- Angiotensin Radioimmunoassay Kit

ARIA Kit

原理(Principles

血漿腎素活性(PRA)的測定是以血管緊張素(A)產生的速率來表示的。血漿中加入

酶抑制劑來抑制轉化酶和血管緊張素酶的活性,A不再進一步降解,使測定結果準確。PRA

的測定是取雙份血漿,一份血漿在 37℃溫育一小時,使腎素作用于血管緊張素原產生 A作為

測定管,另一份血漿在 4℃放置作為對照管。應用放射免疫分析法 A的濃度減去對照管 A

的濃度,被溫育時間除之,則為單位時間內 A產生的速率,稱為腎素活性。本分析藥盒標記

物為 125I-A,采用免疫分離劑分離,快速﹑方便﹑準確。

用途(Intended Use

腎素是由腎臟近球體細胞產生的分子量為 40000 的一種羧基蛋白水解酶。它作用于血管緊

張素原產生血管素(A10 )A在轉化酶的作用下形成血管緊張素(A8 肽)。腎素-血

管緊張素系統有多種生理功能。在調節人體血壓、水和電解質平衡代謝過程中起著重要作用。

另外,它與一些腎臟疾病及與腎臟有關的一些疾病有密切關系。

血漿腎素活性(PRA)和 A濃度的測定已成為原發性和繼發性高血壓分型診斷、治療及

研究的重要指標。對一些有關腎臟疾病的診斷、治療以及發病機理的探討有著重要的意義。

藥盒組成(Components of Kit

1)

A標準品:凍干品,一套共 7 瓶,用 1 mL 溫育液溶解

A

B

C

D

E

F

單位

0

0.2

0.6

1.8

5.4

12

ng/mL

2)

125I-A1 瓶 凍干品,100T 11 mL 溫育液溶解,50T 5.5 mL 溫育液溶解。

標準品、標記物溶解后分裝–10℃保存可用一個月,避免反復凍融。

3)

A抗體:

1 瓶 凍干品,100T 12 mL 溫育液溶解,50T 6 mL 溫育液溶解,

4) 溫育液:

1

5) 分離劑:

1 瓶 使用前必須充分搖勻

6) 抗凝劑:

1 瓶 若有晶體析出可加熱溶解

7) 酶抑制劑: 2

正常參考值(Normal Serum values

各實驗室應根據本實驗室條件及接觸人群的不同,建立自己的正常值范圍。

下列數據僅供參考:

坐姿: 1.68 ± 1.12 ng/mL注意事項(Attention):血樣的采集和保存

1) 待樣本脈搏穩定后,坐姿采集肘靜脈血 2 mL,迅速注入在冰水浴中冷卻的含 20 μL EDTA

試管中,搖勻,放冰水浴中冷卻后,在 1000 /分離心 5 分鐘( 4℃離心),分離血漿,

取血漿 1 mL 放入另一支已預冷的含有 10 μL 酶抑制劑 1 20 μL 酶抑制劑 2 的試管中搖勻,

立即測定或置–20℃冰箱保存,可用兩周。

2) 激發試驗,樣本在基礎狀態采血后,給肌肉注射速尿(0.7 mg/Kg 體重)。總劑量不超過 50

mg,保持立位不飲水,兩小時后坐姿采血。

注意:注射速尿后兩小時內隨尿排出的水電解質較多,如樣本血鉀過低,試血前應適當給

予補充,試驗過程中樣本可能出現口渴、無力、出汗等,一般不重,如過重應酌情終止試

驗,讓樣本平臥,并給予糖鹽茶水。

3) β-阻斷劑、血管擴張劑、利尿劑及甾體激素、甘草等影響體內腎素水平,一般在停藥兩周

后測 PRA,得血平等代謝慢的藥物應停藥三周后測定,不適停藥的樣本應改服胍乙啶等影

PRA 較小的降壓藥。

4) 鈉攝入量影響機體 PRA 水平,樣本測定 PRA 三天前應適當減少鈉鹽攝入量,樣本應測定

取血前 24 小時尿鈉的含量,以供分析 PRA 結果時參考。

操作流程(Assay Procedure

冰凍的血漿樣品在流動的冷水中快速融化,快速取兩份樣品,一份作對照管的放冰水浴中,一

份做測定管的在 37℃水浴中保溫 1 小時,取出后放入冰水浴中。隨后在冰水浴中按下表加樣

單位:μL

T

NSB

標準品

樣品

A

B

C

D

E

F

G

1

2

···

溫育液

200

標準品

100

100

100

100

100

100

100

對照管

100

100

···

測定管

100

100

···

125I-A

100

A抗體

100

搖勻,4℃放 15 小時以上

分離劑

500

充分混勻,室溫放置 15 分鐘后,3500 rpm 離心 20 分鐘

吸去上清液

沉淀計數 1 分鐘

數據處理(Calculation

按常規方法計算 NSB%B0%B/B0%

在半對數坐標紙上,以標準品 A濃度為橫坐標,以 B/B0%為縱坐標,繪制標準曲線,根

據血漿樣品(B/B0%)從標準曲線上查得樣品測定管和對照管相應的 A濃度值。

PRA ng/mL/hr = 測定管 A濃度 對照管 A濃度

(當血漿 A濃度超過標準曲線范圍時,應將 37℃處理的血漿用溫育液適當稀釋后復測)

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